美以袭击伊朗并导致伊朗最高领袖哈梅内伊身亡后，巴基斯坦当地时间1日爆发全国性的反美抗议活动。《今日印度》报道称，截至当地时间2日，抗议活动已导致至少35名平民死亡，10人受伤。巴基斯坦《商业纪事报》2日称，美国驻巴基斯坦大使馆当天发布安全警报，同时取消了所有美国签证及美国公民服务预约。同时，巴基斯坦与阿富汗边境冲突仍在持续，巴方1日宣布打死415名阿富汗塔利班武装分子。鉴于国内外紧张局势，巴基斯坦总理夏巴兹·谢里夫推迟了原定于3日启程的俄罗斯之行。
巴基斯坦《黎明报》2日称，在巴南部信德省的卡拉奇市，抗议者1日试图冲击美国领事馆区域。有人攀爬领事馆大门，进入通往领事馆大楼的通道，打碎多扇玻璃窗。参与游行的民众对《环球时报》记者表示，近千名卡拉奇民众根据社交媒体上的约定，来到美国驻卡拉奇领事馆外高呼“为哈梅内伊复仇”“反对美国”等口号，但随后现场情况失控。警方使用催泪瓦斯和警棍控制局势。当天晚些时候，当地政府部门人员试图在美国领事馆附近放置集装箱封锁道路时，抗议者投掷石块，导致更多抗议者与警方发生冲突。警方表示，共有10人在冲突中死亡，73人受伤。
信德省首席部长赛义德·穆拉德·阿里·沙阿1日在一份声明中称：“在这悲痛的时刻，信德省人民与伊朗以及所有哀悼的人们站在一起，表达同样的团结之情。”他对抗议中的人员伤亡表示哀悼，同时表示政府绝不能允许任何人以身试法，“国家面临战争般局势之际，破坏和平与秩序的行为是不合时宜的”。
《黎明报》报道称，在首都伊斯兰堡，数千人举行抗议活动。警方开枪驱散抗议者，试图阻止他们进入美国大使馆区域。至少两名抗议者死亡，30多人受伤。此外，在吉尔吉特-伯尔蒂斯坦地区，抗议者放火焚烧一个联合国办事处，并试图袭击军事设施，安全部队随即开火，造成7人死亡。在巴基斯坦东部城市拉合尔以及北部重镇斯卡杜，也有数千人走上街头抗议。
英国《卫报》1日称，作为什叶派著名领袖，哈梅内伊身亡震惊了中东乃至整个伊斯兰世界。卡塔尔半岛电视台2日称，1日的巴基斯坦反美抗议主要由该国的什叶派穆斯林领导。据法国国际广播电台1日报道，巴基斯坦什叶派占其总人口约15%，是世界上最大的什叶派群体之一。他们过去经常举行反以色列和反美国的集会，但发动如此大规模的抗议实属罕见。美国驻巴基斯坦大使馆1日发表简短声明称，正在密切关注美国在巴使领馆附近发生的示威活动。
巴基斯坦内政部1日发布通知称，除事先获得许可外，禁止在任何公共场所、街道、道路或空地举行此类抗议活动。巴内政部长穆赫辛·纳克维1日发表声明称：“公民不应以暴制暴，而应以和平的方式表达抗议。”
据《纽约时报》1日报道，美以对伊朗的空袭引发伊朗邻国阿富汗和巴基斯坦的恐惧、不安和动荡。巴基斯坦教派冲突历史悠久，伊斯兰世界的地缘政治变化以及伊朗和地区国家之间的紧张关系经常加剧这种冲突。巴基斯坦长期以来一直在伊朗、沙特和美国之间小心翼翼地维持外交平衡。巴基斯坦外交部谴责了“针对伊朗的无端袭击”，但没有点名美国或以色列。
不过，巴基斯坦各政治和宗教团体纷纷谴责美以杀害哈梅内伊的行为。据巴基斯坦《论坛报》2日报道，巴基斯坦正义运动党在声明中谴责称，美以杀害伊朗最高领袖严重违反国际法，并警告称此类行为可能进一步破坏本已动荡不安的地区局势。该党敦促华盛顿和特拉维夫“立即停止任何进一步的非法侵略或升级行动”。巴基斯坦伊斯兰大会党主席哈菲兹·纳伊姆·拉赫曼称：“美国和以色列再次证明自己是恐怖主义国家。” 他称此次袭击公然违反了国际法和《联合国宪章》，并警告说，漠视国际规则将对世界和平构成严重威胁。他还批评了任何有关伊朗政权更迭的声音，称其等同于践踏国际法。
巴基斯坦著名宗教学者纳克维1日呼吁巴基斯坦人民在局势日益紧张之际保持和平。他表示，巴基斯坦目前正面临动荡，这源于全球范围内、尤其是犹太复国主义势力所策划的阴谋。他补充说，巴基斯坦国内面临着恐怖主义威胁，同时边境地区也面临着挑战。
1日，阿富汗边境警察发言人法鲁基表示，阿富汗与巴基斯坦在托尔哈姆口岸再次爆发冲突，阿富汗部队正使用重型武器和激光武器打击巴基斯坦的重要目标。巴基斯坦政府1日发表声明说，鉴于当前国内及地区局势，总理夏巴兹已推迟原定的访俄行程，“新的访问日期将在双方协商后另行公布”。俄新社报道说，夏巴兹原计划3日至5日访俄。
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